三級甲等綜合醫(yī)院國營
北京協(xié)和醫(yī)院是集醫(yī)療、教學(xué)、科研于一體的現(xiàn)代化綜合三級甲等醫(yī)院,是國家衛(wèi)生健康委指定的全國疑難重癥診治指導(dǎo)中心,最早承擔(dān)高干保健和外賓醫(yī)療任務(wù)的醫(yī)院之一,也是高等醫(yī)學(xué)教育和住院醫(yī)師規(guī)范化培訓(xùn)國家 級
(1)新鮮抗凝血標(biāo)本,用比重1.077的淋巴細(xì)胞分離液作密度梯度分離,取淋巴細(xì)胞層細(xì)胞離心涂片,空氣干燥。或不作細(xì)胞分離,直接涂片。
(2)涂片用過氧化氫-甲醇液于4℃下固定20~30min,以阻斷細(xì)胞的內(nèi)源性過氧化酶。
(3)涂片在0.1mol/L磷酸鹽緩沖液中浸泡15min,滴加正常兔血清,以減少抗體非特異性結(jié)合。
(4)滴加兔抗牛TdT抗體,37℃保溫30min。
(5)滴加羊抗兔IgG抗體,37℃保溫30min。
(6)滴加PAP免疫復(fù)合物,37℃保溫30min。
(7)將涂片浸入DAB溶液,室溫作用5~10min。
(8)水洗5min,干后鏡檢,或用哈氏蘇木素染液復(fù)染胞核10min。
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