1.涂片檢查
取患者尿道分泌物或宮頸分泌物,作革蘭氏染色,在多形核白細胞內找到革蘭氏陰性\n雙球菌,涂片對有大量膿性分泌物的單純淋菌性前尿道炎患者,此法陽性率在90%左右,可以初步診斷,女性宮頸分泌物中雜菌多,敏感性和特異性較差,陽性率僅為50-60%,且有假陽性,因此世界衛生組織推薦用培養法檢查女病人,慢性淋病由于分泌物中淋球菌較少,陽性率低,因此要取前列腺按摩液,以提高檢出率。\n咽部涂片發現革蘭氏陰性雙球菌不能診斷淋病,因為其他奈瑟菌屬在咽部是正常的菌群,另外對癥狀不典型的涂片陽性應作進一步檢查。
2.培養檢查
淋球菌培養是診斷的重要佐證,培養法對癥狀很輕或無癥狀的男性,女性病人都是較敏感的方法,只要培養陽性就可確診,在基因診斷問世以前,培養是世界衛生組織推薦的篩選淋病的唯一方法,目前國外推薦選擇培養基有改良的Thayer-Martin(TM)培養基和New York City(NYC)培養基,國內采用巧克力瓊脂或血瓊脂培養基,均含有抗生素,可選擇地抑制許多其他細菌生長,在36℃,70%濕度,含5%-10%CO2(燭缸)環境中培養,24-48小時觀察結果,培養后還需進行菌落形態,革蘭氏染色,氧化酶試驗和糖發酵試驗等鑒定,培養陽性率男性80%-95%,女性80-90%。
3.抗原檢測
1.固相酶免疫試驗(EIA):可用來檢測臨床標本中的淋球菌抗原,在流行率很高的地區而又不能作培養或標本需長時間遠送時使用,可以在婦女人群中用來診斷淋球菌感染。\n2.直接免疫熒光試驗:通過檢測淋球菌外膜蛋白I的單克隆抗體作直接免\n疫熒光試驗,但目前在男女二性標本的敏感不高,特異性差,加之實驗人員的判斷水平,故該實驗尚不能推薦用來診斷淋球菌感染。
4.基因診斷
1.淋球菌的基因探針診斷\n淋球菌的基因探針診斷,所用的探針有:質粒DNA探針,染色體基因探針和rRNA基因探針。\n(1)質粒DNA探針\n① 隱蔽質粒DNA探針,淋球菌質粒分為三種:接合性質粒,分子最大,為36kb DNA; 耐藥性質粒包括兩個質粒,DNA長分別為5.6kb和7.1kb;隱蔽質粒4.2kb,其中隱蔽質粒存在于96%的臨床淋球菌分離株中,其它奈瑟菌不含有此質粒,故可用它的序列作為特異DNA探針檢測淋球菌,Torres采用核酸雜交技術檢測淋球菌,所用探針為隱蔽質粒,用該探針對134株淋球菌和131株相關菌株的檢測,有124株淋球菌雜交反應陽性,占93%,還可與個別其它的奈瑟菌出現交叉反應,對測定探針的敏感性實驗表明可檢出102CFU淋球菌,研究證明隱蔽質粒中CPPB基因序列在所有的淋球菌染色體中(包括不含該質粒的菌株),因此CPPB基因探針具有良好的特異性和敏感性,Torres等用CPPB基因探針檢測了201份臨床標本, 采用非放射性地高辛標記系統, 其敏感性和特異性分別為95%和98%。\n② 耐藥性質粒DNA探針\n淋球菌的抗藥質粒可分為:\n①產青毒素酶淋球菌(PPNG)其β-內酰胺酶陽性;\n②具有高水平的質粒介導的耐四環素淋球菌(TRNG)。\nPPNG菌株是1976年首次在實驗室分離得到的,該菌中含有編碼產青毒酶的基因,該基因既可整合于染色體上也可出現在質粒DNA中,而后者居多,稱之為產青毒素酶質粒,質粒有二種,大小分別為7.4kb和5.3kb,Pescador1998年設計一特異的檢測淋球菌編碼β-內酰胺酶基因的探針,采用酶化學發光法標記,液相雜交,用測光計測是特異雜交體的光量,在4h內可檢測104-105CFU的PPNG菌株,TRNG菌株雖對四環素耐藥,但通常對β-內酰胺酶類及喹諾酮類抗菌素敏感,因此,在實驗室藥敏檢測中可歸為敏感細菌,Pescador用抗四環素淋球菌(TRNG)tetm基因的寡核苷酸探針